實驗動物舍設施標準操作程序--農業生物科技學系(所)

國立嘉義大學實驗動物照護及使用委員會：B2 生物農業科技館實驗動物舍
SOP 編號：B2-011	核可日期：105 年 8 月 25 日	頁次：1 / 2

實驗動物止痛、麻醉、術前與術後照顧通則 ★SOP 編號 B2-011

一、目的：

此規範的目的在確保術後的嚙齒類實驗動物得以順利恢復。同時讓動物使用者可於疼痛發生時採取適當的措施。

二、適用範圍：

進行手術之實驗大鼠與小鼠。

三、程序：

（一）嚙齒類實驗動物次要存活性手術：

1. 所有器械應於手術前完成消毒。

2. 手術操作區需以 70%酒精或四級胺類消毒劑進行消毒。

3. 動物必須沒有任何臨床症狀。

4. 手術區域的毛髮應於術前剃除乾淨，同時應清潔皮膚，並以 70%酒精或手術專用碘液進行消毒。

5. 手術操作人員應穿戴無菌手套及手術口罩。若連續進行多項手術，應於不同手術間更換手套。

（二）嚙齒類實驗動物主要存活性手術：

1. 動物準備：

（1）評估健康狀態。建議動物應在手術前 1-2 週送達動物房，以讓動物有時間消除運送所造成的緊迫。

（2）動物必須沒有任何臨床症狀。

（3）由於大鼠與小鼠無發生術間或術後嘔吐的危險，故無須禁食。但若是與消化道有關的手術，禁食幾個小時方可進行手術。

2. 術前準備：

（1）進行嚙齒類實驗動物手術時不一定需要獨立的空間，但至少應為一個整齊的，且不是很多人往來經過的區域，以利無菌操作進行。

（2）手術桌面與器械必須徹底消毒。

（3）手術操作人員應使用適當的麻醉以確實阻斷疼痛反射。動物必須秤重已估算正確的麻醉用量。例如：

→以 50-100 mg/kg ketamine + 5-15 mg/kg xylazine 的劑量進行腹腔注射，麻醉時間少於 30 分鐘。如果必須延長手術時間，可追加給予原劑量的 1/10至 1/3。

→氣體麻醉如 isoflurane 需要有適當的抽風排除系統，以確保研究人員的安全。

→Sodium pentobarbital 以 30-40 mg/kg 的劑量進行腹腔注射。

→Avertin（2.5 gm 2,2,2 Tribromoethanol、5 ml amylene hydrate [2-methyl-2-butanol, tertiary amyl alcohol]；200 ml 蒸餾水- pH 中性），藥物劑量以 250 mg/kg B.W.腹腔注射給藥

（4）麻醉期間，應維持動物正常體溫。大鼠與小鼠有較高的體表面積，因此散熱較快。手術期間動物發生死亡的主要原因，常為體溫過低所致，不在麻醉或手術本身。建議可使用循環式溫水毯或保溫燈以保持動物體溫。

（5）剃除手術區域周圍的毛髮，以避免毛髮造成污染。剃除過大範圍的毛髮會降低動物體溫調節的能力，應避免。

（6）手術區域的消毒至少有 2 個步驟。建議先以 70％酒精擦拭，接著以碘液塗佈於手術區域皮膚表面。避免將動物的全身皮膚都弄濕，否則可能造成動物體溫過低、甚至死亡。

（7）術間建議塗抹無菌眼藥膏於動物雙眼，以避免手術過程中角膜乾燥受損。

（8）執行手術的人員應於術前用抗菌劑刷手。術者與相關助手，均應穿戴無菌手套與口罩，並務必穿著乾淨的實驗衣或刷手服。

3. 手術：

（1）術間動物應維持在適合手術的麻醉狀態，並隨時監控麻醉深度，例如可定期觀察呼吸、黏膜顏色、及捏動物腳趾反射。

（2）手術過程中所有用到的器械及材料均應滅菌。

（3）為了避免創口及手術器械受到污染，應在動物體表覆蓋創巾。創巾應覆蓋動物的所有暴露區域，包括尾巴及四肢。

（4）每 10 分鐘監控與評估動物的生命表徵。

（5）選擇適用的方法與材料縫合創口。用於皮膚的縫線應使用無毛細現象、且為不可吸收性的材質，以降低術後感染的風險。

4. 術後照顧：

（1）將動物移到溫暖、乾燥的場所，並持續觀察動物恢復時的生命表徵（例如呼吸與黏膜顏色）。

（2）可由皮下提供輸液（乳酸林格氏液 40-80 ml/kg/24 hr），並提供保暖以利術後動物的恢復，也可在鼠籠內放置微濕的飼料。

（3）將術後觀察的結果記錄於術後觀察記錄表。手術記錄表與術後觀察記錄表可自行設計，但內容至少應包括：IACUC No.、手術日期、動物體重、麻醉劑使用、止痛劑使用、動物呼吸、活動力、傷口之觀察。

（4）依據實驗計畫書投予止痛藥，並記錄於術後觀察記錄表。建議術前投與止痛劑。大小鼠疼痛評估與常用止痛藥如附件。

（5）在動物完全由麻醉狀態恢復後，才可以將動物送回原飼育房舍。該動物的鼠籠應明顯標示，以利獸醫師在術後 2 天內追蹤動物的健康狀況。

（6）術後 3 天內，應至少每天檢查一次動物，檢查的項目包括縫合的創口紅腫的狀況，或是創口有無分泌物，動物的飲食、泌尿、排便狀況等。

（7）若於術前或術後須使用廣效性的注射型抗生素藥物，可選用下列其一：

→ Baytril（enrofloxacin）用於大鼠的劑量是以肌肉注射或皮下注射，每日兩次給予 2.5-5 mg/kg。

→Cephalexin 用於大鼠的劑量是以皮下注射，每日兩次給予 15 mg/kg。

→Trimethoprim/sulfadiazine 用於大鼠的劑量是以皮下注射給予 0.5 ml/kg， 240 mg/ml（即 120 mg/kg）。

（8）術後 10-14 天，拆除皮膚的縫線或皮釘。

（9）當發現術後併發症（如感染或恢復期拖長），應立即與獸醫師聯繫。

四、參考資料：

（一）國研院國家實驗動物中心 http://www.nlac.org.tw/n7/n7-2-1.asp

（二）實驗動物管理與使用指南第三版（擴充版）

http://animal.coa.gov.tw/html/index_04_3_1.html